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如何种冬虫夏草

归档日期:11-06       文本归类:冬虫草      文章编辑:爱尚语录

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  推举于2016-09-02伸开一共冬虫夏草,又称为夏草冬虫,简称虫草。全寰宇目前已报道察觉由虫草属真菌Cordyceps寄生于虫豸、蜘蛛和其他生物长出子实体的虫草品种达400众种;我邦已记实68种。正在邦外里极少人和学者的观点中,把普通由虫草属真菌寄生并能爆发子实体的菌物联结体都通称为冬虫夏草。然而,中邦古代的中医药学和我邦绝大个人学者和人们及本文所指的冬虫夏草,是特指仅散布于我邦青藏高原及边际区域高寒草甸中的中华虫草菌Cordyceps sienesis (Berkeley) Saccardo (1878)寄生于虫豸纲、鳞翅目、蝙蝠蛾科、蝠蛾属Hepialus小虫感病后造成的虫、菌联结体;;而其他类群仅称为虫草,不是正宗的冬虫夏草。

  药用冬虫夏草,最早的文字睹于清朝汪昂的《本草备要》(1694)所载:冬虫夏草,甘平,保肺益肾,止血化痰,止劳咳。四川嘉定府所产者佳。冬正在土中,形如老蚕,有毛能动,至夏则毛出土上,连身俱化为草。若不取,至冬复化为虫。自后,赵学敏的 《本草纲目拾遗》(1756)一书中纪录:夏草冬虫,功与人参同,能治诸虚百损,该书还对冬虫夏草的产地、食用形式和用量有周密的记述。1757年吴仪洛所著的 《本草从新》一书也指出:“冬虫夏草保肺益肾、止血化痰。”其后 《黔囊》、《文房肆考》、《四川通志》、《本草图说》等数百部古药书中都纪录了冬虫夏草。

  我邦把冬虫夏草动作药材出口到海外的史册比文字纪录的更深远。从明代中叶1400一1465年间就从浙江传到日本,并正在贵族中普遍食用。1723年由欧洲的宣道士尚加特利茨库把从中邦西北采到的冬虫夏草带到法邦,由Reaumur正在法邦科学院的学士大会作了先容,并登正在集会纪要上;1943年,Berkeley审定了中邦的冬虫夏草,正式命名为:中邦虫草Sphaeri sienesis;1878年由Saccardo归为虫草属Cordyceps,冬虫夏草的考虑正在海外惹起珍贵,中邦虫草也起首着名于世。

  冬虫夏草因为仅散布于中邦,又是数百年来我邦和亚洲百姓视为与自然人参、鹿茸相媲美的贵重滋补中药材,享有极高的声誉。它药性感化温和,比其他品种的滋补品更具有普遍的药用和食用性,永恒今后是我邦既可药用又可食用的高级滋补品,而且一年四序都可食用,对老、少、病、弱、虚者皆宜服用,无任何副感化。古代70众部中药学文献把冬虫夏草的功用总结为:能阴阳并补,治劳嗽膈症,诸虚百损;功与人参、鹿茸同,但药性温和,老少病虚者皆宜食用……。新中邦修树今后,我邦有200众部药书周密纪录了冬虫夏草的药效与用处,历部 《中华百姓共和邦药典》纪录其功用为:补肺益肾,止血化痰。用于久咳虚喘,劳嗽咯血,阳痿遗精,腰膝酸痛。跟着邦外里医学的生长和中药学正在全寰宇渐渐普及,近年来察觉冬虫夏草的功用结果越来越普遍。经考虑证据,它是具有镇定,止血,抗惊厥,降压,改观心肌缺血,抗血小板凝固,抗衰老,调剂人体免疫和具有抗肺癌、淋巴癌和肝癌成效的药物。目前越来越惹起邦外里药学界和生物学界考虑者的珍贵,相合考虑报道多量补充。

  最早科学地描绘和揭晓我邦青藏高原有蝠蛾属虫豸散布是英邦的Poujade1886年正在四川省的宝兴县雪山上察觉一种蝠蛾,被他命名为德氏蝠蛾Hepialus davidi;自后Alphe raky、Staudinger等学者永诀于1889和1895年正在西藏察觉了暗色蝠蛾H.nebulosus(同种异名:泥色蝠蛾H.luteus)、异色蝠蛾H.varians两个品种。1909年Oberthur正在法邦的Armorica半岛上拾掇由中邦西藏、四川带去的药材和植物标本中,察觉一头蝠蛾成虫,并以该半岛名称命名为H.armoricanus,但正在揭晓新种时注解,该种蝠蛾产地不妨是中邦川藏高原,因正在半岛无间未再察觉有该种蝠蛾散布;自后无间到1959年中邦科学院动物考虑所科研职员正在四川康定等地采到多量的蝠蛾成虫和小虫,经朱弘复审定,与正在法邦Armorica半岛察觉的蝠蛾是统一种,从而命名为虫草蝙蝠蛾,并确定为中邦特产的冬虫夏草菌的寄主虫豸之一。到目前为止,正在青藏高原及边际区域已察觉中邦特有的冬虫夏草菌寄主虫豸37种。

  冬虫夏草人工培养正在近20年来宇宙先后有60众个科研单元和数千人实行了多量的考虑、实习和探求;云南、四川等地已正在高海拔区域得到了小面积培养有性型告成的履历,但因为周期长,高海拔区域无推行对象、投资大、效益不如自然收罗的上等众种身分,无间未能大面积推行。正在云南、四川、浙江、甘肃、青海、北京、福修、广东、贵州、广西等省(市、区)中低海拔区域,展开人工培养有性型冬虫夏草考虑也有众年,固然正在某极少合节上已有众家得到了相当可喜的结果或成效,如云南和四川等省已正在昆明、成都和重庆的室内人工批量、反复孳生告成蝠蛾虫豸;浙江等地正在室内零碎孳生告成蝠蛾虫豸;但因为没有管理虫与菌接种和批量、反复长出子座体的难合,不行称为培养告成。离小面积、小批量、众次反复正在低海拔人工培养出有性型冬虫夏草的宗旨都还相当遥远;固然数家已声称正在中、低海拔批量培养告成有性型冬虫夏草,毕竟上科学的可托度极低。由于!

  (1)目前还无一家能永恒又安静地折柳提拔到正宗的冬虫夏草真菌 (即频频正在提拔基上批量长出子座)。青诲、云南、四川、北京等地正在提拔基上都提拔出过子座,但其子囊孢子稀疏或无子囊孢子,况且孕育都担心静,不行注解已负责了有性型人工正在中低海拔的培养身手。

  (2)冬虫夏草菌无性型人工提拔身手对照容易负责,正在室内接种到蝠蛾小虫上也能影响成为僵虫期,但确罕睹有告竣有性型,长出子座体和子囊孢子。

  (3)目前子座的造成除了海拔、天色、泥土、气压等众种情况身分外,其菌之间是否众菌复合影响?假使是复合影响,又是哪极少菌正在起症结感化?正在什么光阴与冬虫夏草菌起感化?等等题目尚不了然。

  所以,要正在中低海拔区域人工批量和反复培养出有性型的冬虫夏草,还需做多量的考虑和实习事情。即是正在高海拔区域实行大面积人工培养冬虫夏草,也还需展开很众身手性的实习事情。于是有性型冬虫夏草人工培养要抵达范围化或物业化出产,考虑还相当困难,途程还卓殊遥远。

  因为有性型冬虫夏草的人工培养麻烦太大,近10众年来,大个人展开冬虫夏草人工培养考虑的单元和考虑职员都纷纷转向无性型的考虑与运用上。因为虫草菌无性型提拔身手容易负责,况且从自然界收罗冬虫夏草折柳出来的真菌,绝大个人理化性子和药理成效与冬虫夏草的有性因素好似,于是各地都把自我折柳出的真菌确定为冬虫夏草菌的无性阶段,并纷纷修厂出产菌粉和开垦运用。目前已从自然界的冬虫夏草体平分离出自我以为是中华虫草菌无性型共有9属31种,个中有16种依然正在北京、吉林、山西、上海、青海、浙江、福修、江西、广东、云南、贵州等19个省 (市)40众家,实行深层大范围发酵提拔和固体提拔菌丝体和分生孢子体动作有性型冬虫夏草的代用品,个人厂家已进入大的物业化出产,如至灵胶囊、金水宝胶囊、宁心宝胶囊、心肝宝、冬虫夏草鸡精、虫草胶囊、冬虫夏草酒、冬虫夏草人参补酒等20众种产物年产值均达万万元至数亿元。况且,因为用菌丝体和分生袍子人工孳生周期短、产量高,往后动作冬虫夏草有性型的代用品,开垦、运用的潜力还极大。

  (一)冬虫夏草茵的寄主虫豸豢养孳生身手要实行冬虫夏草的人工培养,起初务必多量人工豢养寄主逐一蝠蛾属虫豸。蝠蛾平生中有98%的工夫都正在泥土内糊口,仅有2.5一13d的成虫期营地面糊口。于是,这类虫豸的人工豢养照料厉重是正在泥土中展开。

  (1)蝠蛾卵的豢养器械。豢养蝠蛾卵可用两种形式,一是用直径15一20cm的玻璃培 养皿,垫上2一3层滤纸,皿内放一块吸水棉维持湿度,每皿可豢养200一500粒卵。此法利于张望,但难负责湿度。二是用l0cm xX5一8cm的广口瓶或者25cm x 30cm的玻璃豢养 缸,内置3一5cm厚的过筛细腐殖土,种上1一2棵珠芽寥植物,把卵放养于土外至lcm深的土层中,每瓶可豢养300一1000粒卵;豢养时只消负责住植物不凋零,即可不加湿度。此法卵的孵化率高,但张望和移植小虫比较较麻烦。

  a.玻璃养虫缸:用18一25cmX30一35cm的玻璃缸,也可用标本浸泡缸,安排泥土15一25cm,种上小虫取食的植物,把刚孵化小虫移入缸内,每缸可豢养10一30头小虫。

  b.地下养虫箱:箱通常高30一50cm,宽20一25cm,厚3一5cm。豢养箱骨架用钢筋 焊成,上面钢筋做成提手,便于提动;宽的两面用3一5mm玻璃,便于张望虫体营谋;底 和两个侧面装上16孔目标铜纱网,便于水分渗透。然后装上泥土,种植饲料植物,每箱放养20一50头小虫;正在较坚实的地上挖一个比豢养箱体积稍大和深的槽,把养虫箱放入槽中,张望时将养虫箱提出地面,抹去外面玻璃上的泥土,即可了然看到小虫营谋景况。

  c.大型养虫笼:正在半自然的景遇下,采选一块排水好、土质松散的地方,挖长12一l5m、宽2一3m、深4Ocm的深槽,底部和边际垫上尼龙纱网(最好用双层,小虫不易钻出),再把松散的腐殖土铲进填平,种上小虫食品,放入小虫豢养,每平方米可放养30一50头;该法有利于大范围豢养,但张望麻烦。

  d.用各样盆具裸露豢养:把植物饲料洗净放入盆中,放入小虫豢养,盆口笼盖一层黑布或者黑纸遮光。此法利于糊口史张望,但要防卫勤换饲料和根除粪便。

  (3)蛹和成虫的豢养器械。制制长50cm、宽50cm、高55一60cm的养虫箱。底部用薄铁板或双层铜纱网封底;顶和边际用铁纱或尼龙纱封盖,前面可制成一道营谋纱网门。正在箱底放入10一20cm的泥土,种上植物,把蛹和成虫放养土中,此法可实行密植豢养。

  (1)泥土的采选。泥土是蝠蛾虫豸平生中最厉重的营谋场合。泥土前提是否适合该虫糊口是人工豢养成活率坎坷的症结之一。最适宜蝠蛾孕育的是高山草甸土;次之是流石滩和草甸混杂土;再次之是高山棕色、暗棕色林土,其他泥土对此虫孕育不良。

  (2)食料的采选。小虫最喜取食圆穗蓼、珠芽蓼、黄芪、小大黄等植物的嫩根芽。因为蝠蛾虫豸是一类杂食性虫豸,正在无上述植物的地方,可用禾本科 (如青稞、麦、谷芽等);十字花科、莎草科的嫩根豢养。正在中、低海拔区域(适宜糊口的温度下)用土大黄、胡萝卜、白萝卜、白薯 (红苕)、马铃薯、苹果等饲喂也能平常孕育发育,最好为土大黄、胡萝卜和白薯三类。

  (3)温、湿度的采选。蝠蛾虫豸是一类耐低温而怕高温的虫豸。最适宜正在15一19C中糊口滋长;此虫最适宜气氛湿度75%一85%,泥土含水量40%一45%之间。

  (1)成虫期。成虫不取食任何食品,只消维持水分和适宜温度即能平常成活和产卵。但蛾子栖息情况与产卵量相合。成虫最喜采选有杜鹃和蝠蛾小虫取食的蓼科等植物根旁产卵,于是正在蛾子交配产卵前植上几株合联植物最佳;此外不行有强光影响。

  (3)小虫期。小虫因为孕育期长,况且虫体壁薄而易破,豢养时必然要留神,除了须要的张望、换土和换食料外,尽量削减翻动。小虫的豢养症结是初孵的小龄光阴,初孵小龄虫要给足微细鲜嫩、湿度不高的食品;泥土最好始末筛检,省得粗硬物擦伤主体。另外,为了伸长食料和泥土不霉坏,退换前用紫外灯照耀杀菌l5min,泥土也可正在阳光下暴晒1一2h后再用。

  (4)蛹期。养蛹时,把养蛹器皿内的泥土压实,然后用与蛹粗细的木棍人工制一土室,土室略斜,深约2一3cm,每室放一蛹,放蛹时,蛹头向土外面,上用细土盖住。蛹的温湿度,可独揽正在大气湿度80%一85%,泥土含水量42一45%之间,温度18一22℃之间。

  (1)原料央求。得回纯的菌种对原料央求对照肃穆;通常来说假使是实行冬虫夏草的构制块折柳法,最佳的折柳原料是每年的10月底至11月份,青藏高原高寒草甸泥土刚起首冻结光阴采的原料,这个光阴冬虫夏草菌刚影响蝠蛾小虫进入僵虫期不长工夫,嫩小的子座芽刚长出虫头部0.2一0.5cm,虫体内其他杂菌较少,最易实行折柳。假使是第二年5一6月份采的原料,僵虫体和子座上都有很众种杂菌共生或腐生,难得回纯菌种。若用子囊孢子实行折柳提拔,原料最好正在每年的7月中、下旬子囊孢子刚有个人成熟期收罗折柳提拔。

  a.僵虫体 (即菌核)的折柳:折柳前,用水刷洗明净主体外面,再用无菌水洗刷2一3次;用0.1%一0.2%的升汞溶液,折半柳原料实行约3一5min的外面消毒;再用无菌水洗刷。采取与胸足为界的前段个人。用剖解刀切去外皮,避开消化道,取血腔菌丝切成芝麻粒巨细,压入平板提拔基中,每皿1一2粒。置于15一19℃中提拔,待菌落长出0.2一0.5cm时,挑选少量菌丝频频正在平板提拔基上分纯2一4次,确定无其他杂菌后,移入试管保留和提拔。

  b.子座芽折柳:从僵虫头顶切下洗净的子座芽,置入0.1%升汞液中消毒2一3min,用无菌水洗净,切取中央部位构制块压入提拔基中;提拔前提同a。

  c.子囊孢子折柳:用透后纸袋套住子囊孢子成熟的子座,让子囊孢枪弹跳粘贴正在纸袋上,然后,把有子囊孢子的纸袋浸入25%的葡萄糖液中,洗下孢子,放入15一19℃中提拔,每天镜检,当袍子萌发时,用微吸管吸单个孢子滴于平板中提拔;提拔前提同a。

  也可把全部成熟的冬虫夏草带回室内,用棉纸把僵虫和连虫体的子座包住,仅留出有孕个人,正在无菌室中,横放,下置一片载玻片,随时维持主体湿度;每天镜检,当看到子囊孢枪弹到玻片时,用微吸管吸到平皿的提拔基中提拔;提拔前提同a。

  a.马铃薯葡萄糖琼脂提拔基 (PDA),此种配方是一共虫草菌属真菌的通用提拔基,正在折柳提拔初期可用该配方,但是菌种孕育不相当繁盛,况且易老化、退化。

  b.加富提拔基 (1):众性卵白脐10g,葡萄糖50g,磷酸氢二钾1g,硫酸镁0.5g,活蚕蛹30g,孕育素0.5μg,琼脂20g,加水1000mL,pH:5.0。

  加富提拔基 (Ⅱ):卵白脯40g,葡萄糖40g,去皮鲜马铃薯100g,磷酸氢二钾1g,硫酸镁0.5g,牛肉膏10g,孕育素0.5μg,蝠蛾活小虫 (磨碎)30g,琼脂20g,高寒草甸土浸出液10OOmL,pH:5.0。

  正在加富提拔基上,菌落比正在PDA提拔基上孕育繁盛和敏捷;加富Ⅱ号又优于Ⅰ号。

  2.孕育性子 冬虫夏草菌的折柳提拔中须负责温度、pH值、光照、碳和氮源及无机盐的运用景遇。

  (1)差异温度对菌丝孕育的影响。冬虫夏草菌喜偏低温度。正在0一4℃时能徐徐孕育;5一8℃时孕育速率加快;10一19℃是此菌较适孕育发育的畛域;最佳孕育温度为15一l9℃。横跨20℃菌丝猛长,菌落由白色变为灰黑或棕黄色,起首浮现变异,于是不宜高温提拔。

  (2)对pH值的央求。冬虫夏草菌是一种偏酸性线以上时,跟着增高或低重,孕育徐徐至不孕育。

  (3)光照的影响。此菌的子囊孢子萌发和菌丝孕育初期,适合于弱光和短光照,后期则适合于较强光照。正在人工提拔中,菌丝、分生孢子和子座等具有昭彰的趋光性,朝阳面孕育众而密,背光面孕育寥落,全黑情况下提拔的种种菌态弱小、颀长、寥落。

  (4)对碳源的运用。冬虫夏草菌可运用众种碳源,但以葡萄糖和麦芽糖适用时孕育最速,单用葡萄糖时也能精良地孕育,次之是马铃薯等淀粉,再次之是蔗糖。

  冬虫夏草菌是一种由寄糊口体寄主,再由腐生阶段发育成熟的真菌,于是对氮源中的众种有机氮均能较好的运用。而以活虫体最佳;卵白胨与酵母膏适用孕育也相当理思,次之是二者寡少利用,再次之是牛肉膏等。而对无机氮如硫酸铵、硝酸钾等运用较差。

  对灰分养料有必然的需求,正在有微量的硫酸镁、磷酸氢二钾的提拔基中孕育繁盛,次之是磷酸二氢钾,其他钠、钙、铁、铜等无机盐也可运用。

  (1)其放大出产的形式常有三种:固体静置提拔法、振荡提拔法和大罐通气发酵提拔法。

  a.静置提拔:厉重用正在固体提拔,如试管斜面、三角瓶提拔、米饭提拔等等。正在静置提拔中只消负责好温度和光照即可使菌平常孕育。当斜面上的分生孢子成熟后,即可存入1一2℃的冰箱中保留8一14个月,也可动作种子直接用于出产。

  b.振荡提拔:采用液体提拔菌种或小范围孳生提拔,都可用振荡提拔。振荡提拔的提拔基,把固体提拔基减去琼脂即可。修造最好选用恒温振荡提拔机,用三角瓶置液体提拔基,把试管固体菌种接入即可提拔。经一向振荡使液体提拔基中种种因素混杂平均而不致重淀,同时督促气体与液体接触和换取,使氧进入液体提拔基中,利于菌丝孕育和分生孢子造成。

  c.大罐通气发酵提拔:正在大范围出产菌丝和分生孢子等菌粉时,务必用大罐通气发酵提拔法。该形式通气是采用吸气或真空泵减压等形式,始末滤器除杂菌,送入罐内液体培 养基中供冬虫夏草菌的孕育发育。

  (2)发酵工艺流程。自然冬虫夏草折柳纯化→ 试管斜面种→ 振荡器液体一级 种→ 二级种→ 小型种子发酵种子罐→ 出产发酵罐 → 浓缩→ 喷粉干燥→ 制品菌粉。

  冬虫夏草菌罐中发酵央求温度正在20一25℃,罐压392.3一686.5kPa(0.4一0.7kg/cmz),通胸襟为0.5一1.OVVm*;注入发酵罐中的液体提拔基为罐容的65%一75%为宜。 接种量为10%,搅拌速率为180r/min,提拔工夫72一96h,即可放罐浓缩和喷粉。

  (3)发酵提拔基众用。鲜马铃薯 (去皮)8%,蔗糖2%,玉米淀粉0.5%,蚕蛹粉1%,卵白胨0.4%,硫酸铵0.2%,pH值5.5一6.0。

  (4)发酵提拔制品圭表。分生孢子即几全零落母体孢子梗,孢子梗数目补充不昭彰 时,正在镜下计数检讨,每毫升含分生孢子18亿一25亿个;残糖低于1%;氨基氮低于0.2mg/mL,即可成为制品菌液。

  4.冬虫夏草菌回接重点 把有性型或无性型的冬虫夏草菌孢子回接到寄主虫豸体上,是人工提拔有性型冬虫夏草和复壮无性型菌种的症结手腕。

  (1)回接光阴。冬虫夏草回接症结正在于采选寄主虫豸抗菌虚弱光阴,一是蜕皮期;二是小虫取食营谋激烈,摩擦毁伤率较高光阴。

  a.喷雾法:当豢养的蝠蛾小虫达4一6龄虫,有1/3以上的小虫蜕皮时,把小虫纠合,用子囊孢子或者分生孢子对入5%一10%葡萄糖液喷雾到虫体或食品上,接种后约30min,菌液正在虫体上略干,把小虫放回泥土中任其自然糊口。此法感病率高,但毛病是,小虫不易从土中取出纠合,况且纠合时小虫有相互屠杀的习性,虫体被咬伤后,易被杂菌影响致死,冬虫夏草菌丝未充满体腔时,伤虫就会溃烂,不行造成僵虫 (菌核)。

  b.自然接触法:正在大面积半自然泥土中豢养蝠蛾小虫,按时取小样张望小虫孕育景遇,当大个人小虫适宜感病时,用饲料植物浸菌液种植和用细土拌菌接种,平均撒入养虫的地外上,然后喷水,使菌渗透土中,小虫取食营谋时接触影响。此法寄主影响率不太高,但曾经影响致病,冬虫夏草菌长势好,况且未感病的蝠蛾小虫能平常孕育,孳生子息。

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