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冬虫下草若何种

归档日期:11-06       文本归类:冬虫草      文章编辑:爱尚语录

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  睁开一齐冬虫夏草,又称为夏草冬虫,简称虫草。全天下目前已报道涌现由虫草属真菌Cordyceps寄生于虫豸、蜘蛛和其他生物长出子实体的虫草品种达400众种;我邦已记实68种。正在邦外里少少人和学者的观点中,把寻常由虫草属真菌寄生并能发生子实体的菌物纠合体都通称为冬虫夏草。然而,中邦古板的中医药学和我邦绝大个人学者和人们及本文所指的冬虫夏草,是特指仅漫衍于我邦青藏高原及周围地域高寒草甸中的中华虫草菌Cordyceps sienesis (Berkeley) Saccardo (1878)寄生于虫豸纲、鳞翅目、蝙蝠蛾科、蝠蛾属Hepialus小虫感病后造成的虫、菌纠合体;;而其他类群仅称为虫草,不是正宗的冬虫夏草。

  药用冬虫夏草,最早的文字睹于清朝汪昂的《本草备要》(1694)所载:冬虫夏草,甘平,保肺益肾,止血化痰,止劳咳。四川嘉定府所产者佳。冬正在土中,形如老蚕,有毛能动,至夏则毛出土上,连身俱化为草。若不取,至冬复化为虫。自后,赵学敏的 《本草纲目拾遗》(1756)一书中纪录:夏草冬虫,功与人参同,能治诸虚百损,该书还对冬虫夏草的产地、食用举措和用量有精确的记述。1757年吴仪洛所著的 《本草从新》一书也指出:“冬虫夏草保肺益肾、止血化痰。”其后 《黔囊》、《文房肆考》、《四川通志》、《本草图说》等数百部古药书中都纪录了冬虫夏草。

  我邦把冬虫夏草行为药材出口到海外的史籍比文字纪录的更久远。从明代中叶1400一1465年间就从浙江传到日本,并正在贵族中寻常食用。1723年由欧洲的宣教士尚加特利茨库把从中邦西北采到的冬虫夏草带到法邦,由Reaumur正在法邦科学院的学士大会作了先容,并登正在集会纪要上;1943年,Berkeley判决了中邦的冬虫夏草,正式命名为:中邦虫草Sphaeri sienesis;1878年由Saccardo归为虫草属Cordyceps,冬虫夏草的商讨正在海外惹起珍贵,中邦虫草也开头著名于世。

  冬虫夏草因为仅漫衍于中邦,又是数百年来我邦和亚洲公民视为与自然人参、鹿茸相媲美的贵重滋补中药材,享有极高的声誉。它药性感化温和,比其他品种的滋补品更具有寻常的药用和食用性,长久此后是我邦既可药用又可食用的高级滋补品,而且一年四序都可食用,对老、少、病、弱、虚者皆宜服用,无任何副感化。古代70众部中药学文献把冬虫夏草的功用归结为:能阴阳并补,治劳嗽膈症,诸虚百损;功与人参、鹿茸同,但药性温和,老少病虚者皆宜食用……。新中邦成立此后,我邦有200众部药书精确纪录了冬虫夏草的药效与用处,历部 《中华公民共和邦药典》纪录其功用为:补肺益肾,止血化痰。用于久咳虚喘,劳嗽咯血,阳痿遗精,腰膝酸痛。跟着邦外里医学的兴盛和中药学正在全天下慢慢普及,近年来涌现冬虫夏草的功用结果越来越寻常。经商讨证据,它是具有镇定,止血,抗惊厥,降压,改观心肌缺血,抗血小板固结,抗衰老,调理人体免疫和具有抗肺癌、淋巴癌和肝癌成效的药物。目前越来越惹起邦外里药学界和生物学界商讨者的珍贵,相合商讨报道大宗填充。

  最早科学地形容和公告我邦青藏高原有蝠蛾属虫豸漫衍是英邦的Poujade1886年正在四川省的宝兴县雪山上涌现一种蝠蛾,被他命名为德氏蝠蛾Hepialus davidi;自后Alphe raky、Staudinger等学者辨别于1889和1895年正在西藏涌现了暗色蝠蛾H.nebulosus(同种异名:泥色蝠蛾H.luteus)、异色蝠蛾H.varians两个品种。1909年Oberthur正在法邦的Armorica半岛上整顿由中邦西藏、四川带去的药材和植物标本中,涌现一头蝠蛾成虫,并以该半岛名称命名为H.armoricanus,但正在公告新种时阐述,该种蝠蛾产地可以是中邦川藏高原,因正在半岛不停未再涌现有该种蝠蛾漫衍;自后不停到1959年中邦科学院动物商讨所科研职员正在四川康定等地采到大宗的蝠蛾成虫和小虫,经朱弘复判决,与正在法邦Armorica半岛涌现的蝠蛾是统一种,从而命名为虫草蝙蝠蛾,并确定为中邦特产的冬虫夏草菌的寄主虫豸之一。到目前为止,正在青藏高原及周围地域已涌现中邦特有的冬虫夏草菌寄主虫豸37种。

  冬虫夏草人工造就正在近20年来宇宙先后有60众个科研单元和数千人举办了大宗的商讨、测验和搜索;云南、四川等地已正在高海拔地域得到了小面积造就有性型告成的体会,但因为周期长,高海拔地域无引申对象、投资大、效益不如自然收集的上等众种成分,不停未能大面积引申。正在云南、四川、浙江、甘肃、青海、北京、福筑、广东、贵州、广西等省(市、区)中低海拔地域,发展人工造就有性型冬虫夏草商讨也有众年,固然正在某少少合键上已有众家得到了相等可喜的劳绩或收获,如云南和四川等省已正在昆明、成都和重庆的室内人工批量、反复滋生告成蝠蛾虫豸;浙江等地正在室内细碎滋生告成蝠蛾虫豸;但因为没有处分虫与菌接种和批量、反复长出子座体的难合,不行称为造就告成。离小面积、小批量、众次反复正在低海拔人工造就出有性型冬虫夏草的倾向都还相等遥远;固然数家已声称正在中、低海拔批量造就告成有性型冬虫夏草,结果上科学的可托度极低。由于!

  (1)目前还无一家能长久又安祥地分辨作育到正宗的冬虫夏草真菌 (即重复正在作育基上批量长出子座)。青诲、云南、四川、北京等地正在作育基上都作育出过子座,但其子囊孢子特别或无子囊孢子,况且滋长都担心祥,不行阐述已负责了有性型人工正在中低海拔的造就技巧。

  (2)冬虫夏草菌无性型人劳动育技巧对照容易负责,正在室内接种到蝠蛾小虫上也能感触成为僵虫期,但确罕睹有完结有性型,长出子座体和子囊孢子。

  (3)目前子座的造成除了海拔、天色、泥土、气压等众种境遇成分外,其菌之间是否众菌复合感触?假设是复合感触,又是哪少少菌正在起症结感化?正在什么功夫与冬虫夏草菌起感化?等等题目尚不大白。

  所以,要正在中低海拔地域人工批量和反复造就出有性型的冬虫夏草,还需做大宗的商讨和测验劳动。即是正在高海拔地域举办大面积人工造就冬虫夏草,也还需发展很众技巧性的测验劳动。于是有性型冬虫夏草人工造就要抵达周围化或物业化坐褥,商讨还相等困难,旅程还额外遥远。

  因为有性型冬虫夏草的人工造就疾苦太大,近10众年来,大个人发展冬虫夏草人工造就商讨的单元和商讨职员都纷纷转向无性型的商讨与行使上。因为虫草菌无性型作育技巧容易负责,况且从自然界收集冬虫夏草分辨出来的真菌,绝大个人理化本质和药理成效与冬虫夏草的有性因素雷同,于是各地都把自我分辨出的真菌确定为冬虫夏草菌的无性阶段,并纷纷筑厂坐褥菌粉和开荒行使。目前已从自然界的冬虫夏草体平分离出自我以为是中华虫草菌无性型共有9属31种,此中有16种曾经正在北京、吉林、山西、上海、青海、浙江、福筑、江西、广东、云南、贵州等19个省 (市)40众家,举办深层大周围发酵作育和固体作育菌丝体和分生孢子体行为有性型冬虫夏草的代用品,个人厂家已进入大的物业化坐褥,如至灵胶囊、金水宝胶囊、宁心宝胶囊、心肝宝、冬虫夏草鸡精、虫草胶囊、冬虫夏草酒、冬虫夏草人参补酒等20众种产物年产值均达万万元至数亿元。况且,因为用菌丝体和分生袍子人工滋生周期短、产量高,以来行为冬虫夏草有性型的代用品,开荒、行使的潜力还极大。

  (一)冬虫夏草茵的寄主虫豸喂养滋生技巧要举办冬虫夏草的人工造就,最初务必大宗人工喂养寄主逐一蝠蛾属虫豸。蝠蛾一世中有98%的时期都正在泥土内生涯,仅有2.5一13d的成虫期营地面生涯。于是,这类虫豸的人工喂养处理要紧是正在泥土中发展。

  (1)蝠蛾卵的喂养东西。喂养蝠蛾卵可用两种举措,一是用直径15一20cm的玻璃培 养皿,垫上2一3层滤纸,皿内放一块吸水棉连结湿度,每皿可喂养200一500粒卵。此法利于张望,但难负责湿度。二是用l0cm xX5一8cm的广口瓶或者25cm x 30cm的玻璃喂养 缸,内置3一5cm厚的过筛细腐殖土,种上1一2棵珠芽寥植物,把卵放养于土外至lcm深的土层中,每瓶可喂养300一1000粒卵;喂养时只消负责住植物不零落,即可不加湿度。此法卵的孵化率高,但张望和移植小虫对照较疾苦。

  a.玻璃养虫缸:用18一25cmX30一35cm的玻璃缸,也可用标本浸泡缸,安插泥土15一25cm,种上小虫取食的植物,把刚孵化小虫移入缸内,每缸可喂养10一30头小虫。

  b.地下养虫箱:箱平常高30一50cm,宽20一25cm,厚3一5cm。喂养箱骨架用钢筋 焊成,上面钢筋做成提手,便于提动;宽的两面用3一5mm玻璃,便于张望虫体举止;底 和两个侧面装上16孔宗旨铜纱网,便于水分渗透。然后装上泥土,种植饲料植物,每箱放养20一50头小虫;正在较坚实的地上挖一个比喂养箱体积稍大和深的槽,把养虫箱放入槽中,张望时将养虫箱提出地面,抹去概况玻璃上的泥土,即可大白看到小虫举止景况。

  c.大型养虫笼:正在半自然的处境下,采取一块排水好、土质松散的场所,挖长12一l5m、宽2一3m、深4Ocm的深槽,底部和周遭垫上尼龙纱网(最好用双层,小虫不易钻出),再把松散的腐殖土铲进填平,种上小虫食品,放入小虫喂养,每平方米可放养30一50头;该法有利于大周围喂养,但张望疾苦。

  d.用百般盆具裸露喂养:把植物饲料洗净放入盆中,放入小虫喂养,盆口遮盖一层黑布或者黑纸遮光。此法利于生涯史张望,但要贯注勤换饲料和排除粪便。

  (3)蛹和成虫的喂养东西。制制长50cm、宽50cm、高55一60cm的养虫箱。底部用薄铁板或双层铜纱网封底;顶和周遭用铁纱或尼龙纱封盖,前面可制成一道举止纱网门。正在箱底放入10一20cm的泥土,种上植物,把蛹和成虫放养土中,此法可举办密植喂养。

  (1)泥土的采取。泥土是蝠蛾虫豸一世中最要紧的举止处所。泥土要求是否适合该虫生涯是人工喂养成活率崎岖的症结之一。最适宜蝠蛾滋长的是高山草甸土;次之是流石滩和草甸夹杂土;再次之是高山棕色、暗棕色林土,其他泥土对此虫滋长不良。

  (2)食料的采取。小虫最喜取食圆穗蓼、珠芽蓼、黄芪、小大黄等植物的嫩根芽。因为蝠蛾虫豸是一类杂食性虫豸,正在无上述植物的地方,可用禾本科 (如青稞、麦、谷芽等);十字花科、莎草科的嫩根喂养。正在中、低海拔地域(适宜生涯的温度下)用土大黄、胡萝卜、白萝卜、白薯 (红苕)、马铃薯、苹果等饲喂也能平常滋长发育,最好为土大黄、胡萝卜和白薯三类。

  (3)温、湿度的采取。蝠蛾虫豸是一类耐低温而怕高温的虫豸。最适宜正在15一19C中生涯滋长;此虫最适宜氛围湿度75%一85%,泥土含水量40%一45%之间。

  (1)成虫期。成虫不取食任何食品,只消连结水分和适宜温度即能平常成活和产卵。但蛾子栖息境遇与产卵量相合。成虫最喜采取有杜鹃和蝠蛾小虫取食的蓼科等植物根旁产卵,于是正在蛾子交配产卵前植上几株合连植物最佳;别的不行有强光影响。

  (3)小虫期。小虫因为滋长期长,况且虫体壁薄而易破,喂养时必定要留神,除了需要的张望、换土和换食料外,尽量省略翻动。小虫的喂养症结是初孵的小龄功夫,初孵小龄虫要给足轻微鲜嫩、湿度不高的食品;泥土最好经由筛检,省得粗硬物擦伤主体。别的,为了延迟食料和泥土不霉坏,转换前用紫外灯映照杀菌l5min,泥土也可正在阳光下暴晒1一2h后再用。

  (4)蛹期。养蛹时,把养蛹器皿内的泥土压实,然后用与蛹粗细的木棍人工制一土室,土室略斜,深约2一3cm,每室放一蛹,放蛹时,蛹头向土外外,上用细土盖住。蛹的温湿度,可担任正在大气湿度80%一85%,泥土含水量42一45%之间,温度18一22℃之间。

  (1)资料请求。得回纯的菌种对资料请求对照庄重;平常来说假设是举办冬虫夏草的构制块分辨法,最佳的分辨资料是每年的10月底至11月份,青藏高原高寒草甸泥土刚开头冻结功夫采的资料,这个功夫冬虫夏草菌刚感触蝠蛾小虫进入僵虫期不长时期,嫩小的子座芽刚长出虫头部0.2一0.5cm,虫体内其他杂菌较少,最易举办分辨。假设是第二年5一6月份采的资料,僵虫体和子座上都有很众种杂菌共生或腐生,难得回纯菌种。若用子囊孢子举办分辨作育,资料最好正在每年的7月中、下旬子囊孢子刚有个人成熟期收集分辨作育。

  a.僵虫体 (即菌核)的分辨:分辨前,用水刷洗明净主体外外,再用无菌水洗濯2一3次;用0.1%一0.2%的升汞溶液,对分辨资料举办约3一5min的外外消毒;再用无菌水洗濯。拣选与胸足为界的前段个人。用剖解刀切去外皮,避开消化道,取血腔菌丝切成芝麻粒巨细,压入平板作育基中,每皿1一2粒。置于15一19℃中作育,待菌落长出0.2一0.5cm时,挑选少量菌丝重复正在平板作育基上分纯2一4次,确定无其他杂菌后,移入试管保全和作育。

  b.子座芽分辨:从僵虫头顶切下洗净的子座芽,置入0.1%升汞液中消毒2一3min,用无菌水洗净,切取中心部位构制块压入作育基中;作育要求同a。

  c.子囊孢子分辨:用透后纸袋套住子囊孢子成熟的子座,让子囊孢枪弹跳粘贴正在纸袋上,然后,把有子囊孢子的纸袋浸入25%的葡萄糖液中,洗下孢子,放入15一19℃中作育,每天镜检,当袍子萌发时,用微吸管吸单个孢子滴于平板中作育;作育要求同a。

  也可把全数成熟的冬虫夏草带回室内,用棉纸把僵虫和连虫体的子座包住,仅留出有孕个人,正在无菌室中,横放,下置一片载玻片,随时连结主体湿度;每天镜检,当看到子囊孢枪弹到玻片时,用微吸管吸到平皿的作育基中作育;作育要求同a。

  a.马铃薯葡萄糖琼脂作育基 (PDA),此种配方是全体虫草菌属真菌的通用作育基,正在分辨作育初期可用该配方,但是菌种滋长不相等兴隆,况且易老化、退化。

  b.加富作育基 (1):众性卵白脐10g,葡萄糖50g,磷酸氢二钾1g,硫酸镁0.5g,活蚕蛹30g,滋长素0.5μg,琼脂20g,加水1000mL,pH:5.0。

  加富作育基 (Ⅱ):卵白脯40g,葡萄糖40g,去皮鲜马铃薯100g,磷酸氢二钾1g,硫酸镁0.5g,牛肉膏10g,滋长素0.5μg,蝠蛾活小虫 (磨碎)30g,琼脂20g,高寒草甸土浸出液10OOmL,pH:5.0。

  正在加富作育基上,菌落比正在PDA作育基上滋长兴隆和急速;加富Ⅱ号又优于Ⅰ号。

  2.滋长特色 冬虫夏草菌的分辨作育中须负责温度、pH值、光照、碳和氮源及无机盐的行使途境。

  (1)差别温度对菌丝滋长的影响。冬虫夏草菌喜偏低温度。正在0一4℃时能迂缓滋长;5一8℃时滋长速率加快;10一19℃是此菌较适滋长发育的界限;最佳滋长温度为15一l9℃。逾越20℃菌丝猛长,菌落由白色变为灰黑或棕黄色,开头展示变异,于是不宜高温作育。

  (2)对pH值的请求。冬虫夏草菌是一种偏酸性线以上时,跟着增高或消重,滋长迂缓至不滋长。

  (3)光照的影响。此菌的子囊孢子萌发和菌丝滋长初期,符合于弱光和短光照,后期则符合于较强光照。正在人劳动育中,菌丝、分生孢子和子座等具有明明的趋光性,朝阳面滋长众而密,背光面滋长希罕,全黑境遇下作育的百般菌态弱小、颀长、希罕。

  (4)对碳源的行使。冬虫夏草菌可行使众种碳源,但以葡萄糖和麦芽糖适用时滋长最速,单用葡萄糖时也能优异地滋长,次之是马铃薯等淀粉,再次之是蔗糖。

  冬虫夏草菌是一种由寄生涯体寄主,再由腐生阶段发育成熟的真菌,于是对氮源中的众种有机氮均能较好的行使。而以活虫体最佳;卵白胨与酵母膏适用滋长也相等理思,次之是二者寡少利用,再次之是牛肉膏等。而对无机氮如硫酸铵、硝酸钾等行使较差。

  对灰分养料有必定的需求,正在有微量的硫酸镁、磷酸氢二钾的作育基中滋长兴隆,次之是磷酸二氢钾,其他钠、钙、铁、铜等无机盐也可行使。

  (1)其夸大坐褥的举措常有三种:固体静置作育法、振荡作育法和大罐通气发酵作育法。

  a.静置作育:要紧用正在固体作育,如试管斜面、三角瓶作育、米饭作育等等。正在静置作育中只消负责好温度和光照即可使菌平常滋长。当斜面上的分生孢子成熟后,即可存入1一2℃的冰箱中保全8一14个月,也可行为种子直接用于坐褥。

  b.振荡作育:采用液体作育菌种或小周围滋生作育,都可用振荡作育。振荡作育的作育基,把固体作育基减去琼脂即可。兴办最好选用恒温振荡作育机,用三角瓶置液体作育基,把试管固体菌种接入即可作育。经无间振荡使液体作育基中百般因素夹杂平均而不致重淀,同时鼓舞气体与液体接触和调换,使氧进入液体作育基中,利于菌丝滋长和分生孢子造成。

  c.大罐通气发酵作育:正在大周围坐褥菌丝和分生孢子等菌粉时,务必用大罐通气发酵作育法。该举措通气是采用吸气或真空泵减压等举措,经由滤器除杂菌,送入罐内液体培 养基中供冬虫夏草菌的滋长发育。

  (2)发酵工艺流程。自然冬虫夏草分辨纯化→ 试管斜面种→ 振荡器液体一级 种→ 二级种→ 小型种子发酵种子罐→ 坐褥发酵罐 → 浓缩→ 喷粉干燥→ 制品菌粉。

  冬虫夏草菌罐中发酵请求温度正在20一25℃,罐压392.3一686.5kPa(0.4一0.7kg/cmz),通怀抱为0.5一1.OVVm*;注入发酵罐中的液体作育基为罐容的65%一75%为宜。 接种量为10%,搅拌速率为180r/min,作育时期72一96h,即可放罐浓缩和喷粉。

  (3)发酵作育基众用。鲜马铃薯 (去皮)8%,蔗糖2%,玉米淀粉0.5%,蚕蛹粉1%,卵白胨0.4%,硫酸铵0.2%,pH值5.5一6.0。

  (4)发酵作育制品模范。分生孢子即几全零落母体孢子梗,孢子梗数目填充不明明 时,正在镜下计数查验,每毫升含分生孢子18亿一25亿个;残糖低于1%;氨基氮低于0.2mg/mL,即可成为制品菌液。

  4.冬虫夏草菌回接重心 把有性型或无性型的冬虫夏草菌孢子回接到寄主虫豸体上,是人劳动育有性型冬虫夏草和复壮无性型菌种的症结步调。

  (1)回接功夫。冬虫夏草回接症结正在于采取寄主虫豸抗菌虚亏功夫,一是蜕皮期;二是小虫取食举止激烈,摩擦毁伤率较高功夫。

  a.喷雾法:当喂养的蝠蛾小虫达4一6龄虫,有1/3以上的小虫蜕皮时,把小虫纠集,用子囊孢子或者分生孢子对入5%一10%葡萄糖液喷雾到虫体或食品上,接种后约30min,菌液正在虫体上略干,把小虫放回泥土中任其自然生涯。此法感病率高,但舛讹是,小虫不易从土中取出纠集,况且纠集时小虫有相互格斗的习性,虫体被咬伤后,易被杂菌感触致死,冬虫夏草菌丝未充满体腔时,伤虫就会衰弱,不行造成僵虫 (菌核)。

  b.自然接触法:正在大面积半自然泥土中喂养蝠蛾小虫,准时取小样张望小虫滋长处境,当大个人小虫适宜感病时,用饲料植物浸菌液种植和用细土拌菌接种,平均撒入养虫的地外上,然后喷水,使菌渗透土中,小虫取食举止时接触感触。此法寄主感触率不太高,但已经感触致病,冬虫夏草菌长势好,况且未感病的蝠蛾小虫能平常滋长,滋生昆裔。

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